液(yè)相色(sè)譜儀的係統由儲(chǔ)液器,泵(bèng),進(jìn)樣器,色(sè)譜(pǔ)柱(zhù),檢測器,記錄儀(yí)等(děng)幾部(bù)分組(zǔ)成。儲液器中的流動相被(bèi)高壓(yā)泵(bèng)打入係統,樣(yàng)品(pǐn)溶(róng)液(yè)經進樣器進入流動(dòng)相,被(bèi)流(liú)動相(xiāng)載入色(sè)譜柱(zhù)(固定相)內,由於(yú)樣品溶(róng)液(yè)中的(dí)各(gè)組分(fēn)在(zài)兩相(xiāng)中(zhōng)具有不同(tóng)的分配係(xì)數,在(zài)兩相(xiāng)中作(zuò)相對運(yùn)動(dòng)時(shí),經過(guò)反(fǎn)復多(duō)次的吸附-解(jiě)吸的分配(pèi)過程,各組分在(zài)移(yí)動(dòng)速度(dù)上產生(shēng)較大的差(chà)別(bié),被分離(lí)成單個組(zǔ)分依(yī)次(cì)從柱(zhù)內流出(chū),通過檢(jiǎn)測(cè)器(qì)時,樣(yàng)品濃度(dù)被(bèi)轉換成(chéng)電信(xìn)號傳送(sòng)到記錄儀,數據(jù)以圖譜形(xíng)式打印(yìn)出(chū)來。
正常情況下,液相色譜(pǔ)儀(yí)色(sè)譜柱(zhù)至少可(kě)以使(shǐ)用3~6個月(yuè),能(néng)完(wán)成數(shù)百(bǎi)次(cì)分(fēn)離。但(dàn)若操作不(bù)慎(shèn),將很(hěn)容易損壞(huài)色譜柱(zhù)而不能(néng)使(shǐ)用。因此為了保持(chí)柱(zhù)效,柱容量(liáng)和滲(shèn)透性(xìng),必須(xū)對色(sè)譜柱(zhù)進(jìn)行仔(zī)細(xì)保養。
一(yī),色譜(pǔ)柱的保(bǎo)護:
1,流動相和樣(yàng)液(yè)都需(xū)用0.45um孔徑(jìng)的(dí)濾(lǜ)膜過濾。
2,加3~5cm保(bǎo)護柱。
3,進(jìn)樣(yàng)閥進樣(yàng)。
4,用純甲(jiǎ)醇保存(cún)色(sè)譜柱,防止細(xì)菌生長(cháng)。
5,防(fáng)止(zhǐ)過酸或過鹼(jiǎn)。
6,防止振動和(hé)逆(nì)向流(liú)動。
7,對矽(guī)膠基鍵(jiàn)合(hé)相(xiāng),水溶(róng)液流動相(xiāng)的PH值(zhí)不(bù)得超出(chū)2~8.5的(dí)範(fàn)圍,使用(yòng)溫度(dù)不宜過高。
8,色譜(pǔ)柱(zhù)在酸性(xìng)或(huò)鹼性條(tiáo)件下(xià)使用(yòng)後(hòu),應依次用(yòng)水和甲(jiǎ)醇(chún)清洗(xǐ)。對(duì)暫(zàn)時不用而需(xū)要(yào)較(jiào)長時間保存的(dí)色譜柱(zhù),要用(yòng)純甲醇清洗。
9,色(sè)譜柱兩(liǎng)端(duān)用(yòng)金屬螺帽(mào)封(fēng)閉(bì),保存(cún)在(zài)幹淨(jìng)的(dí)有機(jī)溶(róng)劑(jì)中(zhōng)。
二(èr),色譜柱的(dí)再(zài)生(shēng):
一般(bān)情況下(xià),矽膠(jiāo)和ODS等化學鍵合(hé)固定相(xiāng)再(zài)生是(shì)困(kùn)難的。有時采用下(xià)述(shù)方(fāng)法(fǎ)可(kě)能(néng)提(tí)高柱效(xiào)。
1,由(yóu)於雜(zá)質(zhì)微(wēi)粒等(děng)因素,使色(sè)譜柱(zhù)上(shàng)端固(gù)定相變色(sè),柱(zhù)效(xiào)下降(jiàng)。這時,可仔細地(dì)將變(biàn)色部分除去約(yuē)3mm左右,再補充新的(dí)固(gù)定相。
2,當(dāng)色譜柱吸附未(wèi)被(bèi)洗脫的成分時,柱效(xiào)將(jiāng)明顯下降,可選擇(zé)合(hé)適的(dí)溶(róng)劑洗(xǐ)淨。
3,當采用(yòng)梯度(dù)洗脫(tuō)時,色譜(pǔ)柱在(zài)重復使用前(qián),用(yòng)泵把幾(jī)倍(bèi)於(yú)柱(zhù)體積的(dí)起始溶劑(jì)壓經(jīng)色譜柱,以(yǐ)重新建(jiàn)立(lì)起(qǐ)始的平衡來(lái)得到再生。